論文の概要: EpidermaQuant: Unsupervised detection and quantification of epidermal differentiation markers on H-DAB-stained images of reconstructed human epidermis
- arxiv url: http://arxiv.org/abs/2406.03103v1
- Date: Wed, 5 Jun 2024 09:45:56 GMT
- ステータス: 処理完了
- システム内更新日: 2024-06-06 18:59:55.889899
- Title: EpidermaQuant: Unsupervised detection and quantification of epidermal differentiation markers on H-DAB-stained images of reconstructed human epidermis
- Title(参考訳): EpidermaQuant: 再構成ヒト表皮のH-DAB染色像における表皮分化マーカーの検出と定量化
- Authors: Dawid Zamojski, Agnieszka Gogler, Dorota Scieglinska, Michal Marczyk,
- Abstract要約: 再建ヒト表皮の一体性は組織学的解析と角化細胞分化マーカーを用いて評価できる。
スキャンされた組織をコンピュータで分析することで、専門家の時間を節約し、定量化の精度を向上させることができる。
染色画像の作成とキャプチャと複数のアーティファクトの存在の間の技術差は、計算方法の結果に影響を及ぼす可能性がある。
- 参考スコア(独自算出の注目度): 0.2008854179910039
- License: http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
- Abstract: The integrity of the reconstructed human epidermis generated in vitro could be assessed using histological analyses combined with immunohistochemical staining of keratinocyte differentiation markers. Computer-based analysis of scanned tissue saves the expert time and may improve the accuracy of quantification by eliminating interrater reliability issues. However, technical differences during the preparation and capture of stained images and the presence of multiple artifacts may influence the outcome of computational methods. Using a dataset with 598 unannotated images showing cross-sections of in vitro reconstructed human epidermis stained with DAB-based immunohistochemistry reaction to visualize 4 different keratinocyte differentiation marker proteins (filaggrin, keratin 10, Ki67, HSPA2) and counterstained with hematoxylin, we developed an unsupervised method for the detection and quantification of immunohistochemical staining. The proposed pipeline includes the following steps: (i) color normalization to reduce the variability of pixel intensity values in different samples; (ii) color deconvolution to acquire color channels of the stains used; (iii) morphological operations to find the background area of the image; (iv) automatic image rotation; and (v) finding markers of human epidermal differentiation with clustering. Also, we created a method to exclude images without DAB-stained areas. The most effective combination of methods includes: (i) Reinhard's normalization; (ii) Ruifrok and Johnston color deconvolution method; (iii) proposed image rotation method based on boundary distribution of image intensity; (iv) k-means clustering using DAB stain intensity. These results should enhance the performance of quantitative analysis of protein markers in reconstructed human epidermis samples and enable comparison of their spatial distribution between different experimental conditions.
- Abstract(参考訳): 組織学的解析とケラチノサイト分化マーカーの免疫組織化学的染色を組み合わせることで,in vitroで得られたヒト表皮の完全性を評価することができる。
スキャンした組織をコンピュータで分析することで、専門家の時間を節約し、インターラッター信頼性の問題を排除することで定量化の精度を向上させることができる。
しかし, 染色画像の作成, キャプチャ, 複数アーティファクトの存在による技術的差異は, 計算結果に影響を及ぼす可能性がある。
DABをベースとした免疫組織化学反応で染色したヒト表皮の断面を再構成した598枚の無注釈画像を用いて4種類のケラチン細胞分化マーカータンパク質(filaggrin, keratin 10, Ki67, HSPA2)を可視化し,ヘマトキシリンと対比し, 免疫組織化学的染色の検出と定量化のための教師なし方法を開発した。
提案されたパイプラインには、以下のステップが含まれている。
一 異なる試料における画素強度値のばらつきを低減するための色正規化
二 使用した染料の色チャンネルを取得するための色脱畳
三 画像の背景領域を見つけるための形態的操作
(四)自動画像回転、及び
(v)クラスタリングによるヒト表皮分化のマーカーの発見。
また,DABを含まない領域を除外する手法も開発した。
最も効果的な組み合わせは以下のとおりである。
(i)ラインハルト正規化
(二)ルフトロックとジョンストンのカラーデコンボリューション法
(iii)画像強度の境界分布に基づく画像回転法
(4)DAB染色強度を用いたK平均クラスタリング
これらの結果は, 再建ヒト表皮におけるタンパク質マーカーの定量的解析性能を高め, 異なる実験条件間での空間分布の比較を可能にした。
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