論文の概要: Single cell resolution 3D imaging and segmentation within intact live tissues
- arxiv url: http://arxiv.org/abs/2501.19203v1
- Date: Fri, 31 Jan 2025 15:13:04 GMT
- ステータス: 翻訳完了
- システム内更新日: 2025-02-03 14:02:33.028444
- Title: Single cell resolution 3D imaging and segmentation within intact live tissues
- Title(参考訳): 単細胞分解能3次元イメージングと生体組織内セグメンテーション
- Authors: G. Paci, P. Vicente-Munuera, I. Fernandez-Mosquera, A. Miranda, K. Lau, Q. Zhang, R. Barrientos, Y. Mao,
- Abstract要約: 本稿では, サンプル調製, イメージング, 深層学習支援セルセグメンテーションのための詳細なステップバイステッププロトコルについて述べる。
このプロトコルは様々なサンプルに適用され、3Dで複雑な解析を必要とする他の組織の研究に有用であると考えています。
- 参考スコア(独自算出の注目度): 2.3326493996358804
- License:
- Abstract: Epithelial cells form diverse structures from squamous spherical organoids to densely packed pseudostratified tissues. Quantification of cellular properties in these contexts requires high-resolution deep imaging and computational techniques to achieve truthful three-dimensional (3D) structural features. Here, we describe a detailed step-by-step protocol for sample preparation, imaging and deep-learning-assisted cell segmentation to achieve accurate quantification of fluorescently labelled individual cells in 3D within live tissues. We share the lessons learned through troubleshooting 3D imaging of Drosophila wing discs, including considerations on the choice of microscopy modality and settings (objective, sample mounting) and available segmentation methods. In addition, we include a computational pipeline alongside custom code to assist replication of the protocol. While we focus on the segmentation of cell outlines from membrane labelling, this protocol applies to a wide variety of samples, and we believe it be valuable for studying other tissues that demand complex analysis in 3D.
- Abstract(参考訳): 上皮細胞は、扁平な球状オルガノイドから密集した擬層組織まで多様な構造を形成する。
これらの文脈における細胞特性の定量化には、真に3次元の構造的特徴を達成するために高解像度のディープイメージングと計算技術が必要である。
本稿では, 蛍光標識細胞を生体組織中の3次元に正確な定量化するために, 試料調製, イメージング, 深層学習支援細胞セグメンテーションのための詳細なステップバイステッププロトコルについて述べる。
ショウジョウバエの羽状円板の3D画像のトラブルシューティングから学んだ教訓を共有し,顕微鏡的モダリティと設定(オブジェクト,サンプル実装)の選択と,利用可能なセグメンテーション法について考察した。
さらに、プロトコルのレプリケーションを支援するために、カスタムコードとともに計算パイプラインも用意しています。
膜ラベリングから細胞アウトラインのセグメンテーションに焦点をあてる一方で、このプロトコルは様々なサンプルに適用され、3Dで複雑な解析を必要とする他の組織の研究に有用であると信じている。
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