論文の概要: Stain-free, rapid, and quantitative viral plaque assay using deep
learning and holography
- arxiv url: http://arxiv.org/abs/2207.00089v1
- Date: Thu, 30 Jun 2022 20:12:36 GMT
- ステータス: 処理完了
- システム内更新日: 2022-07-04 14:53:49.504951
- Title: Stain-free, rapid, and quantitative viral plaque assay using deep
learning and holography
- Title(参考訳): 深層学習とホログラフィを用いた無染色・迅速・定量的ウイルスプラークアッセイ
- Authors: Tairan Liu, Yuzhu Li, Hatice Ceylan Koydemir, Yijie Zhang, Ethan Yang,
Hongda Wang, Jingxi Li, Bijie Bai, Aydogan Ozcan
- Abstract要約: プラークアッセイ(Plaque assay)は、複製競合性ビリオンの濃度を定量化するための金標準法である。
レンズレスホログラフィーとディープラーニングを用いた迅速で無臭な定量的ウイルスプラークアッセイを行った。
テストあたりのオブジェクトの0.32ギガピクセル/時間位相情報を、ラベルフリーで30x30mm2の範囲をカバーする。
- 参考スコア(独自算出の注目度): 2.164181985292877
- License: http://arxiv.org/licenses/nonexclusive-distrib/1.0/
- Abstract: Plaque assay is the gold standard method for quantifying the concentration of
replication-competent lytic virions. Expediting and automating viral plaque
assays will significantly benefit clinical diagnosis, vaccine development, and
the production of recombinant proteins or antiviral agents. Here, we present a
rapid and stain-free quantitative viral plaque assay using lensfree holographic
imaging and deep learning. This cost-effective, compact, and automated device
significantly reduces the incubation time needed for traditional plaque assays
while preserving their advantages over other virus quantification methods. This
device captures ~0.32 Giga-pixel/hour phase information of the objects per test
well, covering an area of ~30x30 mm^2, in a label-free manner, eliminating
staining entirely. We demonstrated the success of this computational method
using Vero E6 cells and vesicular stomatitis virus. Using a neural network,
this stain-free device automatically detected the first cell lysing events due
to the viral replication as early as 5 hours after the incubation, and achieved
>90% detection rate for the plaque-forming units (PFUs) with 100% specificity
in <20 hours, providing major time savings compared to the traditional plaque
assays that take ~48 hours or more. This data-driven plaque assay also offers
the capability of quantifying the infected area of the cell monolayer,
performing automated counting and quantification of PFUs and virus-infected
areas over a 10-fold larger dynamic range of virus concentration than standard
viral plaque assays. This compact, low-cost, automated PFU quantification
device can be broadly used in virology research, vaccine development, and
clinical applications
- Abstract(参考訳): プラークアッセイ(Plaque assay)は、複製競合性溶質ビリオンの濃度を定量化するための金標準法である。
ウイルスプラークアッセイの迅速かつ自動化は、臨床診断、ワクチン開発、組換えタンパク質または抗ウイルス剤の製造に有益である。
本稿では,レンズレスホログラフィと深層学習を用いた迅速かつ無染色な定量ウイルスプラーク測定法を提案する。
このコスト効率が高くコンパクトで自動化された装置は、従来のプラークアッセイに必要なインキュベーション時間を著しく短縮し、他のウイルス定量法よりもその利点を保っている。
この装置は、テストあたりのオブジェクトの0.32ギガピクセル/時間位相情報を取り込み、ラベル無しで30x30mm^2の範囲をカバーし、完全に染色を除去する。
我々は,Vero E6細胞とvesicular stomatitis virusを用いたこの計算法の有効性を実証した。
ニューラルネットワークを用いて、インキュベーション後5時間以内に、ウイルス複製による第1細胞ライシングイベントを自動的に検出し、20時間以上で100%特異なプラーク形成単位(pfus)に対して90%以上の検出率を達成し、48時間以上を要する従来のプラークアッセイと比べて大きな時間を節約する。
データ駆動型プラークアッセイは、細胞単分子膜の感染領域を定量化し、標準のウイルスプラークアッセイよりも10倍のダイナミックレンジのウイルス濃度でPFUおよびウイルス感染領域の自動カウントおよび定量を行う能力も提供する。
このコンパクトで低コストで自動化されたpfu定量装置は、ウイルス学研究、ワクチン開発、臨床応用に広く使用できる
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